بررسی مولکولی و بهینه سازی تولید آنزیم آلکالین پروتئاز در ایزوله های باسیلوس

پایان نامه
چکیده

پروتئازها یکی از مهمترین آنزیم های صنعتی هستند. پروتئازها دارای کاربردهای زیادی در صنایع گوناگونی همچون صنایع غذایی، شوینده ها، داروسازی، چرم و غیره می باشند. این آنزیم ها معمولاً برای مصارف صنعتی به وسیله ی باکتری هایی که متعلق به جنس باسیلوس هستند تولید می شوند. در این مطالعه، پروتئاز قلیایی تولید شده توسط سویه ی rz1 باسیلوس از چشمه های سبلان جداسازی شده بود. آنزیم در محدوده ی ph از 7 تا 12 فعال بود و بهترین فعالیت را در ph برابر با 9 داشت، اگرچه یک پیک کوچکی نیز در ph برابر با 4 مشاهده شد که این حضور 2 نوع پروتئاز را پیشنهاد می کرد. آنزیم در محدوده ی دمایی 20 تا 90 درجه ی سانتی گراد فعال بود و در 60 درجه ی سانتی گراد بیشترین فعالیت را داشت. پروتئاز بطور ویژه ای در حضور zn+2،ba+2،cu+2 وco+2 مهار شده درحالی که بطور نسبی توسط fe+2 وna+2 مهار می شد. همچنین mn+2، mg+2 وca+2 فعالیت آنزیم را تقویت می کردند. بررسی پروفایل پروتئین های ترشحی در سطح sds-page نشانگر تعداد بسیار زیادی باند پروتئینی بود. بررسی اثر مهارکننده ها در غلظت 5 میلی مولار نشان داد که edta قادر به مهارکردن پروتئاز بود درحالی که pmsf مهار نسبی ای داشت. این نتایج نشان داد که پروتئاز مورد مطالعه یک متالو آنزیم است. برخی برهم کنش ها سبب کاهش فعالیت آن می شود که به نظر می رسد یک ریشه ی سرین در جایگاه فعالش دارد.km و فعالیت ویژه ی آن بر روی کازئین محلول به ترتیب mg/ml 625/1 و u/mg 082/11443 بود. این آنزیم دارای خصوصیات بیوشیمیایی خوبی همچون پایداری در دماها و ph های بالا بود.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

کاربرد طرح مرکب مرکزی چرخش پذیر به منظور بهینه سازی تولید آنزیم آلکالین پروتئاز خارج سلولی توسط سویه جداسازی شده جدید باسیلوس پسودوفیرموس MSB4

مقدمه: پروتئازهای قلیایی خارج سلولی با منشا میکروبی، یکی از مهم‌ترین آنزیم‌های صنعتی بوده که کاربردهای فراوان در صنایع مختلف دارند. در این مطالعه، تولید پروتئاز قلیایی باکتری باسیلوس پسودوفیرموس MSB4 با استفاده از روش‌شناسی سطح پاسخ افزایش یافت. مواد و روش‏‏ها: چهار متغیر مستقل موثر، بر اساس نتایج به دست آمده از روش تک عاملی (غلظت زایلوز، غلظت عصاره گوشت، pH و دمای انکوباسیون)، به منظور تجزیه و...

متن کامل

بهینه سازی تولید آنزیم فیتاز در باسیلوس پانتاتنیکوس

محبوبه خزائی1، احمد علی پوربابایی1*، سید علی رضایی1فیتازها گروه ویژه ای ازفسفاتازها می باشند که هیدرولیز مرحله به مرحله فسفات را از مولکول فیتات انجام می دهند،فیتات منبع اصلی ذخیره فسفات در دانه گیاهان می باشد.این دسته ازآنزیم ها دربین گیاهان ریزسازواره ها وحیوانات پراکندگی وگستردگی دارند. هدف از این پژوهش بهینه سازی تولید آنزیم فیتاز در باسیلوس پانتاتنیکوس می باشد. شرایط بهینه از نظر دما ، pH ...

متن کامل

غربال گری استرپتومایسس دی استاتیکوس مولد آنزیم پروتئاز قلیایی و بهینه سازی شرایط تولید آن

زمینه و اهداف: پروتئازهای قلیایی در صنایع مختلفی از جمله داروسازی، عکاسی، ابریشم، غذایی، چرم سازی، شوینده و ... کاربرد دارند. اکتینومیست ها باکتری هایی گرم مثبت هستند که آنزیم های مختلفی از جمله پروتئازها را تولید می کنند. هدف از این پژوهش غربال گری اکتینومیست های بومی مولد پروتئاز قلیایی از نمونه های خاک و بهینه سازی شرایط تولید آنزیم پروتئاز قلیایی آن ها می باشد. مواد و روش کار: در این تحقیق ...

متن کامل

کاربرد طرح مرکب مرکزی چرخش پذیر به منظور بهینه سازی تولید آنزیم آلکالین پروتئاز خارج سلولی توسط سویه جداسازی شده جدید باسیلوس پسودوفیرموس msb۴

مقدمه: پروتئازهای قلیایی خارج سلولی با منشا میکروبی، یکی از مهم ترین آنزیم های صنعتی بوده که کاربردهای فراوان در صنایع مختلف دارند. در این مطالعه، تولید پروتئاز قلیایی باکتری باسیلوس پسودوفیرموس msb4 با استفاده از روش شناسی سطح پاسخ افزایش یافت. مواد و روش‏‏ها: چهار متغیر مستقل موثر، بر اساس نتایج به دست آمده از روش تک عاملی (غلظت زایلوز، غلظت عصاره گوشت، ph و دمای انکوباسیون)، به منظور تجزیه و...

متن کامل

بهینه سازی تولید آنزیم پروتئاز قلیایی در بستر جامد توسط اعضاء جنس باسیلوس با استفاده از بستر جدید سیب زمینی و کاه گندم

  در این تحقیق ، سویه هایی از جنس باسیلوس جدا شده از خاکهای قلیایی استان گیلان با توانایی تولید آنزیم پروتئاز غربالگری و شناسایی گردیدند. سپس تولید آنزیم در انواع بسترهای جامد با تغییر فاکتورهای تأثیرگذار در تولید ، مورد ارزیابی قرار گرفت. بهترین بستر تولید بستر ترکیبی کاه گندم و سیب زمینی و بهترین شرایط تولید به ترتیب زمان انکوباسیون h 96، محتوی رطوبت اولیه %250 و منبع کربن کمکی گلوکز بود. در ...

متن کامل

بهینه‌سازی تولید آنزیم آلکالین پروتئاز به سویه‌ای از جنس Bacillus جدا شده از خاک

22 سویه باکتری قلیادوست از خاک‌های نمکی قلیایی استان گیلان در محیط milk Agar به‌منظور بررسی توانایی تولید آنزیم آلکالین پروتئاز جداسازی شد. از میان باکتری‌های جداسازی شده، اعضای جنس باسیلوس بیشترین توانایی تولید را نشان دادند. بررسی اثر درجه‌ی حرارت، زمان انکوباسیون، منبع کربن، ازت و pH نشان داد که بهترین شرایط تولید، به‌ترتیب در C ْ40 به‌مدت 20 ساعت با استفاده از 5/1% گلوکز (وزنی به حجمی)، 1% س...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه محقق اردبیلی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023